第72回 「マンスリー形態マガジン」 2017年4月号

一口情報

　今回は、普通染色（MG染色）におけるクロマチンと核小体について迫ってみました。
1）クロマチン構造
   核は、核膜を境目とする空間のなかに糸状の核色質（クロマチン）がもつれ合って網目状の構造を作っています。そしてクロマチンはMG染色で紫褐色に染着されてみえます。
クロマチンが核内でもつれ合って染色された様姿をクロマチン網工（核網工）といい、それは大きく、網目状を呈するもの（網状）や顆粒状を呈するものに分けられます。網状配列を呈するものには、①網目の緻密なもの、②粗荒なもの、クロマチンの太いもの、繊細なものがあり、顆粒状配列を呈するものには、①繊細なもの、②緻密なものがあります。それらの所見を巧みにあやつり細胞特有の核質構造を捉えることになります。通常、成熟の血液細胞は多かれ少なかれ粗大な外見を呈し、繊細な網目状ないし顆粒状のクロマチン網工は未熟や幼若細胞に見られやすい。また、クロマチンは量的に評価する場合もあり、核全体が濃い目に染着される場合はその増量として、薄い場合は狭量（?）として捉えるようにしています。

2）核小体
   核のなかにクロマチンとは区別されて、米粒のような格好をした小さな構造物が核小体です。
MG染色で、青色ないし紫青色に染着され、数は1～2個から3～4個など様々です。あまり染着されない状態でも、その周囲にクロマチンが粘着して核小体の輪郭を示している場合もあります。
通常、核小体は成熟の血液細胞で観察されることは少なく、未熟な細胞ほど多くみられます。
核小体はリボソームを生成する場であり、生成されたリボソームは細胞質におけるタンパク合成の場となり、核小体の大きな細胞ほどタンパク合成が旺盛といえます。また、細胞の増殖には細胞構成タンパク質の合成亢進が必要であるため、核小体が細胞の増殖に深く関わっているのも事実です。
従って、核小体は幼若細胞にみられる小器官というだけではなく、増殖相にある細胞にもみられる小器官ともいえます。例えば、バーキット白血病/リンパ腫では比較的大きな核小体を有する細胞の増殖が特徴ですが、それは増殖が盛んであることを意味し、それに符合するかのように細胞分裂像、高尿酸血症がみられるのも納得ゆく所見です。

小宮正文：図説血球のみかた.3-4,南江堂
阿南建一ほか：白血球形態.605-612,Medical　Technology.vol.19,No.7.医歯薬出版.1991

問題 1

（正解と解説）
   骨髄にみられた類似細胞または鑑別細胞を提示しました。細胞同定に核質構造を読み取ることは重要であり、なかでもクロマチン網工や核小体の判定は形態診断に影響を与えます。それらの捉え方を｢一口情報｣にまとめてみましたので参考にしてください。

【正答】

(case A) 前骨髄球（好中性）、 (case B) 前骨髄球（好塩基性）、 (case C) 前骨髄球（好中性）
(case D) 病的な前骨髄球（好中性）、 (case E) 前単球、  (case F) 単芽球、 (case G) 前単球、 (case H) 前赤芽球

【解説】

（BM-MG ×1000）

(case A)
細胞径20μm大、核は偏在傾向で核形不整は軽度、核小体は不明瞭でクロマチン網工は粗網状、細胞質の塩基性は弱く赤褐色の粗大な一次（アズール）顆粒がみられることより好中性の前骨髄球に同定しました。




(case B)
細胞径20μm大、核は偏在傾向で核形不整は軽度、核小体はみられるようで（青矢印）クロマチン網工は粗荒、細胞質の好塩基性は弱く、A.よりもさらに大きな黒紫色の顆粒（1～2μm）が核の上にもみられます。核の分葉傾向はみられず幼若型として捉え、好塩基性の前骨髄球に同定しました。



(case C)
細胞径20μm大、核は偏在傾向で核形不整は軽度、核小体は明瞭のようで（青矢印）クロマチン網工は粗顆粒状、細胞質の好塩基性は強く顆粒は少ない。核の陥没部分にはゴルジ野がうかがえ好中性の前骨髄球に同定しました。





(case D)
細胞径17μm大、亜鈴状の核形不整で核小体がみられ（青矢印）クロマチン網工は繊細、細胞質は好塩基性で微細顆粒を有する芽球を思わせます。周囲には複数のアウエル小体を有するものもみられ、またPO染色に強陽性を呈したことより病的な前骨髄球に同定しました。



(case E)
細胞径25μm大、核に偏在傾向はなく核形不整が顕著（リアス式海岸様）で核小体は複数認め（青矢印）クロマチン網工は繊細、細胞質の好塩基性は強くやや太めのアズール顆粒がみられます。核縁の歪な不整や複数の核小体より前単球に同定しました。本顆粒は通常より大型であることから二次的変化によるものが考えられます。


(case F)
細胞径25μm大、核は僅かに偏在傾向で円形核、核小体は明瞭（青矢印）でクロマチン網工は粗顆粒状、細胞質の好塩基性は強く顆粒は認めません。大型でN/C比が低く、明瞭な核小体や顆粒を認めないことより単芽球に同定しました。




(case G)
細胞径23μm大、核はやや偏在傾向で核形不整が顕著、核小体は明瞭で（青矢印）クロマチン網工は繊細網状、細胞質の好塩基性は強く顆粒は充満し、二重構造（赤矢印）がみられることより前単球に同定しました。




(case H)
細胞径28μm大、核は円形でほぼ中心性、核小体がみられ（青矢印）クロマチン網工は粗顆粒状、細胞質の好塩基性は強度で､核縁の4時方向にはゴルジ野がうかがえ、大型であることより前赤芽球に同定しました。ただ、核小体についてはくっきり見えないことが多いようです。

問題 2

   30-35歳、女性の例。全身倦怠感にて来院され、血液検査で白血病が疑われ入院となりました。
入院時、発熱、歯肉出血があり、肝脾腫やリンパ節腫大は認めませんでした。

【解説】

(PB-MG ×1000)

(BM-MG ×400)

(BM-MG ×1000)

(BM-P0 ×1000)

【末梢血液像所見】（A図）
   白血球数増加（73,400/μL）の末梢血液像で芽球は10%、単球が60%と増加していました。

【骨髄像所見】（B図）
   過形成の骨髄（46.5万/μL）で芽球は20%前後、以下単球系の成熟過程（前単球から単球）が70%と増加していました。

【特殊染色】（C図、D図）
   PO染色（C）は陽性の顆粒球系2個に対し、単球系は一部が陽性（矢印）ですが大半が陰性でした。
EST染色（D）は非特異的ESTの1つであるアセテート染色を提示しました。増加する単球系はびまん性陽性がみられ、それらはNaFに阻害されました。

【染色体所見】
   46,XX　

【表面形質】
   CD4・CD11b・CD11c・CD14・CD64（＋）、HLA-DR（＋）

【臨床診断】
   末梢血は芽球と単球の増加がみられたことより急性単球性白血病を疑いました。
骨髄は過形成のなか単球系が主体で、それらには分化過程がうかがえ、単芽球が20%前後、以下前単球から単球系が70%で分化型の急性単球性白血病を考えました。光顕的診断の確定にはPO染色とEST染色になりますが、PO染色では単球系は大半が陰性で、アセテートEST染色で単球系はびまん性の陽性を呈し分化型急性単球性白血病と診断しました。通常EST染色はブチレートを基質に用いた方法は顆粒状に染まりますが、アセテートを基質に用いた場合はこのようにびまん性に染まりますので、弱陽性の場合は特に判定に留意します。
経験的にブチレートより感度は高いようです。但し、EST二重染色にはクロロアセテートとの相性がよいブチレートが使用されます。臨床的にも歯肉出血は皮膚浸潤とともに急性単球性白血病でよくみられる症状のようです。